GFP是什么意思
保持荧光活性)。为了进一步提升荧光强度,科学家们开发了优化的突变型GFP,如EGFP (Enhanced Green Fluorescent Protein),它的荧光强度是普通GFP的35倍,极大地增强了作为报告基因的敏感度。EGFP融合表达的成功案例众多,其N端和C端的融合灵活性使得它在生物标记和蛋白质研究中具有无可替代的价值。
促进了其在研究中的广泛应用。多种应用中,GFP被广泛用于分子生物学。它可以作为实现许多功能目的的手段,如融合标签、转录报告者、FRET、分裂EGFP、生物传感器、光遗传学、细胞标记/选择、FACS、发育/转基因用途、纯化等。GFP的新用途无时无刻不在实现,或许你也可以发现属于你自己的新应用。
这一结构提供了色基发射荧光的微环境,该环境排除了基质及氧对色基发光的影响。只具备一级结构GFP是不能发光的,功能性色基的形成是在转录翻译后,并经历一个环化反应和一个需分子氧的氧化步骤。
来源:首次发现于日本科学家下村修在1962年的研究中,是由美国西北海岸的水母Aequorea victoria分泌的一种蛋白质。组成:由238个氨基酸组成的单体蛋白质,分子量约为27kD。特性:能发出绿色荧光,是荧光蛋白中的先驱,为生物学研究提供了直观的标记手段。
FLAG标签利用与抗-FLAG抗体的结合,方便免疫吸附纯化,而Strep II标签依赖streptavidin结合,便于高特异性纯化。GFP和其变体eGFP/eCFP/eYFP/mCherry标签,作为荧光标记工具,便于蛋白的定位和功能研究。CBP和CBD标签用于钙调蛋白和几丁质结合蛋白的纯化,CBD具有温和的洗脱条件。
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