印迹杂交技术检查什么
是DNA/RNA的杂交,它是一项用于检测特异性RNA的技术,RNA混合物首先按照它们的大小和相对分子量通过变性琼脂糖凝胶电泳加以分离,凝胶分离后的RNA通过southern印迹转移到尼龙膜或硝酸纤维素膜上,再与标记的探针进行杂交反应,通过杂交结果分析可以对转录表达进行定量或定性。它是研究基因表达的有效手段。
核酸杂交通常在支持膜上进行,因此也被称为核酸印迹杂交。这一技术的应用范围广泛,可以用于DNA和RNA的检测与分析。根据检测样品的不同,核酸杂交技术可以进一步分为DNA印迹杂交(Southern blot hybridization)和RNA印迹杂交(Northern blot hybridization)。
在印迹过程中,会使用待测物质作为探针,与膜进行杂交。杂交后,通过放射自显影技术,曝光斑会在X光片上显现,或者通过生物素-亲和素-酶标记系统,待测分子会在滤膜上形成明显的色斑。这些显色斑点直接指示了待测DNA、RNA或蛋白质的存在,是研究中检测和分析这些分子的重要步骤。
Northern印迹分析(Northern Blotting):Northern印迹分析通过电泳分离RNA样品,并将其转移到膜上,然后使用与目标RNA互补的DNA或RNA探针进行杂交。这种方法可以确定RNA的大小、数量和分子量,并检测特定的RNA序列。
杂交后带有放射性的。DNA留在纤维素膜上,经过放射自显影后,在X光底片上出现黑色区带证实该片段就是目标DNA片段。(2)Northern Blotting:特指RNA印迹杂交,与Southern Blotting的区别在于印迹转移的材料为RNA而非DNA。
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